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IgG Fc系列产品——IgG结构药物的同型对照，选它就对了！

IgG类抗体因其高特异性和优越的药代动力学，自20世纪90年代末以来，特别是1997年首个抗肿瘤抗体药物Rituximab首次获批后，引起了制药业的极大关注。如今，IgG类抗体已被用于治疗癌症和自身免疫疾病等领域，取得巨大成功。IgG类抗体药物发挥治疗作用的机制各有不同，其中一个重要机制就是Fc介导的效应功能(ADCC、ADCP、CDC)。
Human IgG有四种亚型，分别为IgG1、IgG2、IgG3和IgG4，含量依次减少，大约分别为61%，32%，4%， 3%。尽管所有的亚型在氨基酸水平上有超过90%是相同的，空间结构相似，但是它们在铰链区长度、二硫键的数量和Fc效应功能方面都具有独特性。
IgG1是肿瘤免疫治疗中最具潜力的亚型。除了Human Fcγs，IgG1也能够有效结合Mouse Fcγs，在小鼠体内模型中也能够观察到明显的效果，在体内的血清半衰期时间较久，从工业化角度看，IgG1能够被高表达并可用Protein-A方式进行纯化，高效经济同时具有较高的稳定性。因此，IgG1也是现阶段最常被使用的IgG亚型。

Human IgG抗体的四种亚型
IgG2主要用来中和抗原或阻断受体配体的结合，ADCC效应表现非常弱，虽然和C1q的结合比较弱，但当抗原或抗体溶度较高时仍旧可以引发CDC效应，同时IgG2是唯一可以结合FcγRIIa (CD32a)的亚型。早期基于IgG2亚型上市的有靶向EGFR的抗体，随着免疫检查点研究的兴起，越来越多IgG2亚型的药物进入临床并上市。
IgG3有一个较长的铰链区域，分子量较大且生物学功能较强。IgG3与FcγRs的结合能力最强，能引发ADCC和ADCP，且CDC效应比IgG1更强。但IgG3的半衰期更短，其R435不同于其他IgG分子的H435，影响其与FcRn的结合，考虑到药代动力学需要更频繁的给药，因而很少选择用来开发抗体药物。同时从经济角度来看，IgG3抗体无法用现阶段工业化常用的Protein-A来进行纯化，且易形成多聚体，这无疑会大大增加纯化成本，这进一步抑制了基于此亚型的抗体开发。
IgG4分子的铰链区较短，与FcγRI（CD64）之外的FcγRs结合较弱，但可能比克隆相关的IgG1具有更强的亲和力，并可能与IgG1竞争结合肿瘤抗原。IgG4与抑制性FcγRIIb结合的亲和力高于其他IgG亚类，可以与其他抗体如IgG1共同结合FcγRIIb，抑制FcγRs介导的功能，IgG4也可以与其他IgG4进行Fab-arm交换，产生具有双特异性功能的单价抗体或亲合性增加的抗体。IgG4无法固定补体，无法在免疫效应细胞上结合活化FcγRs，可能导致抗体介导的CDC、ADCC和ADCP的阻断。不同于以往抗体依赖ADCC活性等杀死细胞的机制，PD-1抗体或者PD-L1抗体的作用机制是阻断PD-1/PD-L1通路，解除对T细胞等的抑制， PD-1抗体Opdivo、Keytruda在设计时正是采用了ADCC活性弱的IgG4亚型。
FDA批准的不同IgG亚型的肿瘤治疗性抗体
https://doi.org/10.1186/s13045-020-00876-4

IgG Fc的结构（绿色所示）
IgG类抗体已被用于治疗癌症和自身免疫疾病，取得巨大成功。在结构方面，目前用于自身免疫性疾病、炎症和肿瘤的单克隆抗体均使用IgG主干。此外，IgG样双特异性抗体、ADC药物、IgG Fc融合蛋白，也离不开IgG的结构骨架。除了增加血清半衰期，Fc的结构还改善了其他特性，如稳定性和溶解性，同时有利于生产过程，简化了下游蛋白药物的纯化。在作用方面，作为目前最有效的生物治疗药物之一，抗体的一个重要方面是它们能够特异性地结合抗原，同时激发免疫效应功能。除了Fab片段与靶抗原表位特异性结合之外，抗体来源的Fc片段还可以与靶细胞和其他细胞上的Fc受体结合。
严格意义上讲，为证明抗体与靶抗原的结合、目标融合蛋白的效应的特异性，由IgG Fc片段产生的非特异性结合信号或基础功能验证不容忽视，合适的同型对照产品不可或缺。
为助力IgG样抗体药物及IgG Fc融合蛋白药物的开发，ACROBiosystems可为您提供一系列同型对照产品IgG Fc。我们的重组蛋白IgG Fc仅包含了铰链区，CH2，CH3序列，而不包含Fab序列，可以作为单抗、IgG样双抗、ADC药物及融合IgG Fc药物的同型对照，应用于药物筛选、功能验证等场景。
此外，IgG Fc蛋白可以作为内源性IgG，与靶向FcRn药物进行结合FcRn的竞争性实验验证。（点击查看：减少还是增加，利用FcRn机制的两种治疗策略尽在掌握）

产品优势

HEK293细胞表达：实现翻译后糖基化修饰，确保蛋白正确折叠

多种属、多亚型： Human IgG1 Fc、IgG2 Fc、IgG3 Fc、IgG4 Fc
Mouse IgG1 Fc、IgG2a Fc、IgG2b Fc
Llama IgG2b Fc，Rabbit IgG Fc

多标签：Tag Free，AvitagTM，His Tag，gD Tag，Flag Tag，AvitagTM &His tag

IgG Fc系列产品

严格质控，品质保证：低内毒素，经测定内毒素＜1.0 EU/μg

高纯度：

经SDS-PAGE验证纯度＞95%

经SEC-MALS验证纯度＞90%

高生物活性：经ELISA&SPR验证，免费提供 Protocol

产品列表

验证数据

高纯度经SDS-PAGE及SEC-MALS验证

经还原条件下SDS-PAGE验证，Human IgG1 Fc, Tag Free(Cat. No. FCC-H5214)纯度高于95%；经SEC-MALS验证，Human IgG1 Fc, Tag Free(Cat. No. FCC-H5214)纯度高于90%，分子量为50-65kDa（二聚体）。

经还原及非还原条件下SDS-PAGE验证，Human IgG4 Fc, Tag Free (Cat. No. IG4-H5205)纯度高于95%；经SEC-MALS验证，Human IgG4 Fc, Tag Free (Cat. No. IG4-H5205)纯度高于90%，分子量为54-66 kDa（二聚体）。

IgG Fc的二级结构经微流控调制光谱（MMS）平台验证 （合作方：RedShiftBio）
IgG Fc的二级结构经微流控调制光谱（MMS）平台验证
IgG Fc的二级结构经微流控调制光谱（MMS）平台验证

经MMS验证，不同IgG Fc具有不同的二级结构。IgG1 Fc和IgG2 Fc的相似性最大，而IgG3 Fc和IgG4 Fc的差异最大。

查看 IgG Fc二级结构深度解析

生物活性经ELISA验证
生物活性经ELISA验证

经ELISA验证，Human CD64, His Tag (Cat. No. FCA-H52H1)可与Human IgG1 Fc, Tag Free (Cat. No. FCC-H5214) 特异性结合，线性区间为1-16 ng/mL。

Protocol

IG1-H8213_ELISA

经ELISA验证，固定的重组Protein G, His Tag (Cat. No. RPG-S3140)可特异性结合生物素化 Human IgG1 Fc, Avitag (Cat. No. IG1-H8213) ，线性区间为0.013-0.512 μg/mL 。

Protocol

亲和力经SPR验证
FCC-H5214_SPR

经SPR验证，经CM5芯片上的anti-His抗体捕获的Human FCGRT&B2M异源二聚体蛋白, His Tag (Cat. No. FCN-H52W7)可以与Human IgG1 Fc, Tag Free (Cat. No. FCC-H5214) 特异性结合，亲和力常数为0.957 μM (Biacore 8K)。

Protocol

IG4-H5205_SPR

经SPR验证，经CM5芯片上的抗anti-His 抗体捕获的Human FCGRT&B2M异源二聚体蛋白, His Tag (Cat. No. FCN-H52W7)可以与Human IgG1 Fc, Tag Free (Cat. No. IG4-H5205) 特异性结合，亲和力常数为0.715 μM (Biacore 8K)。

Protocol

应用场景一：IgG Fc作为同型对照，验证同亚型的单克隆抗体与靶点抗原特异性结合

Mouse IgG2a Fc作为同型对照，验证Mouse IgG2a CD3单克隆抗体(Clone: OKT3)与Human CD3蛋白特异性结合

Mouse IgG2a Fc

经ELISA验证，Human CD3 epsilon & CD3 delta Heterodimer Protein, His Tag&Tag Free (MALS verified) (Cat. No. CDD-H52W1) 可与Monoclonal Anti-Human CD3 Antibody, Mouse IgG2a (Clone: OKT3), Ultra-low endotoxin (Cat. No. CDE-M120a)特异性结合，线性区间为0.2-3 ng/mL, 与Mouse IgG2a Fc Protein, Tag Free (MALS verified)(Cat. No. IGA-M5207) 不结合。

Protocol

应用场景二：IgG Fc作为同型对照，验证同亚型的双特异性抗体/IgG Fc融合蛋白与靶点抗原特异性结合

Human IgG1 Fc作为同型对照，验证anti-BCMA×CD3 scFv- Human IgG1 Fc Tag双特异性抗体与Human CD3蛋白特异性结合。

Human IgG1 Fc

经ELISA验证，Human CD3 epsilon & CD3 delta Heterodimer Protein, His Tag&Tag Free (MALS verified) (Cat. No. CDD-H52W1) 可与anti-BCMA×CD3 scFv特异性结合，线性区间为0.08-3 ng/mL, 与Human IgG1 Fc Protein, Tag Free (MALS verified)(Cat. No. FCC-H5214) 不结合。

Protocol

Human IgG1 Fc作为同型对照，验证anti-BCMA×CD3 scFv- Human IgG1 Fc Tag双特异性抗体与Human BCMA蛋白特异性结合。

Human IgG1 Fc

经ELISA验证，Human BCMA / TNFRSF17 Protein,His Tag (HPLC-verified) DMF Filed (Cat. No. BCA-H522y) 可与anti-BCMA×CD3 scFv特异性结合，线性区间为0.08-3 ng/mL, 与Human IgG1 Fc Protein, Tag Free (MALS verified)(Cat. No. FCC-H5214) 不结合.

Protocol

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相关参考文献

Fc gamma receptors: glycobiology and therapeutic prospects

How to select IgG subclasses in developing anti-tumor therapeutic antibodies

Fc fusion as a platform technology: potential for modulating immunogenicity

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